目的探讨circ₀003159对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响及其作用机制。方法选取2015年6月至2018年12月嘉兴市第二医院肿瘤外科经手术切除的30例患者的胃癌组织和配对的癌旁组织。采用qRT-PCR法检测胃癌组织和癌旁组织中circ₀003159、miR-32-5p和第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因（PTEN）的表达水平;以及胃癌细胞株（BGC823、AGS、MKN45）和正常胃黏膜上皮细胞株GES-1中circ₀003159的表达水平。选取circ₀003159表达水平最低的胃癌BGC823细胞系,建立circ₀003159超表达模型,设立circ₀003159超表达组（转染circ₀003159模拟物）和阴性对照组（转染空载体阴性对照物）。采用CCK-8法和Transwell小室实验检测circ₀003159超表达对BGC823细胞增殖、侵袭和迁移的影响;生物信息学方法对circ₀003159或miR-32-5p进行靶基因预测,并通过双荧光素酶报告基因验证miR-32-5p与circ₀003159或PTEN的靶向关系;采用Western blot法检测过表达miR-32-5p对PTEN蛋白表达的影响。结果胃癌组织中circ₀003159和PTEN的相对表达水平均明显低于癌旁组织（均P0003159的相对表达水平均明显低于正常胃黏膜上皮细胞GES-1（均P0003159的相对表达水平最低。相比于阴性对照组,circ₀003159超表达组在48、72 h时OD450表达水平均明显下调（均P0003159超表达组中细胞侵袭数和迁移数均明显减少（均P0003159潜在的靶基因,PTEN是miR-32-5p潜在的靶基因。荧光素酶报告基因实验结果显示,与对照组比较,过表达miR-32-5p组中circ₀003159-MUT和PTEN-MUT相对活力值比较差异均无统计学意义（均P>0.05）,而circ₀003159-WT和PTEN-WT相对活力值比较均明显下调（均P0003159超表达显著抑制了胃癌细胞增殖、侵袭和迁移能力,其机制可能是通过靶向下调miR-32-5p对PTEN的抑制作用。

上一篇：抑制剂负调控抑制肝癌细胞侵袭的作用机制研究
下一篇：没有了