中国微侵袭神经外科杂志

微小218-5p 调控Wnt 家族成员2B 抑制骨肉瘤细 

来源:中国微侵袭神经外科杂志 【在线投稿】 栏目:期刊导读 时间:2021-01-28

目的探讨微小RNA-218-5p(miR-218-5p)对骨肉瘤细胞增殖,侵袭和迁移能力的影响及其作用机制。方法 2016年1月至2019年1月,实时荧光定量PCR检测miR-218-5p在骨肉瘤与正常骨组织及正常成骨细胞株与骨肉瘤细胞株的表达差异。应用CCK-8法检测过表达miR-218-5p对人骨肉瘤细胞株143B增殖的影响;细胞划痕实验检测和Transwell小室实验检测过表达miR-218-5p对骨肉瘤细胞143B迁移能力的影响。同时,应用在线miRNA靶基因预测软件预测miR-218-5p的靶基因,并应用荧光素酶报告实验进行结合位点验证。蛋白质印迹法验证靶基因的蛋白表达水平。结果 miR-218-5p在骨肉瘤组织中的表达水平(0.)%明显低于正常骨组织,骨肉瘤细胞系中的表达水平(0.)%、(0.)%、(0.)%、(0.)%明显低于正常成骨细胞,P6h(0.),t24h(0.),t48h(0.),t72h(1.),侵袭(164±12)个和迁移距离()%明显减弱,P<0.05。应用TargetScan网站进行预测,结果显示Wnt家族成员2B(WNT2B)为miR-218-5p的潜在靶基因之一;荧光素酶报告实验结果表明miR-218-5p直接靶向WNT2B;蛋白质印迹法证实miR-218-5p过表达组细胞中WNT2B蛋白的表达水平较对照组明显减少。结论 miR-218-5p在人骨肉瘤组织和癌细胞中低表达,其可能通过靶向WNT2B抑制骨肉瘤细胞143B的增殖、迁移和侵袭。

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